- DNA平端连接注意事项 所属分类:DNA连接 日期:2011-03-22 点击:430 顶:0 T4噬菌体DNA连接酶可以催化平端DNA片段的连接,由于DNA很容易成为平端,所以这是一个极为有用的酶学物性。 Read More >>
- DNA连接试验 所属分类:DNA连接 日期:2010-02-22 点击:687 顶:2 当我们已经获得目的基因片段,选择好适当的克隆(或表达,转化)质粒载体,并确定重组方案后,下面要进行的就是DNA片段之间的体外连接,从而获得重组子.此重组子可转入相应的宿主菌中用于对目的基因的扩增以及目的基因表达(如现代基因工程药物的生产),还可用于序列分析和转基因等重要生物技术的研究中. Read More >>
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平端DNA连接
所属分类:DNA连接 日期:2010-02-22 点击:176 顶:2
T4噬菌体DNA连接酶不同于大肠杆菌DNA连接酶,它可以催化平端DNA片段的连接(Sgaramella和 Khorana,1972;Sgaramella和Ehrlich,1978),由于DNA很容易成为平端,所以这是一个极为有用的酶学物性.有了这样的物性,才能使任何DNA分子彼此相连.
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外源DNA和质粒载体的连接反应
所属分类:DNA连接 日期:2010-02-22 点击:430 顶:2
实际上在有克隆用途中,T4噬菌体DNA连接酶都是首选的用酶.这是因为在下沉反应条件下,它就能有效地将平端DNA片段连接起来.
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DNA连接技术
所属分类:DNA连接 日期:2010-02-22 点击:104 顶:2
当载体 DNA 和外源 DNA 末端都是由一种产生粘性末端的内切酶切割产生的话,或者两者末端被接上一段互补的多聚体的尾巴,那么经退火后可形成新的重组分子.连接后产生的重组分子中仍然保留着外源 DNA 两端的限制性内切酶切点 ,从而使我们能方便地从重组分子再次取出所克隆的DNa段.
Read More >> - 连接酶介绍 所属分类:DNA连接 日期:2010-02-22 点击:100 顶:2 DNA连接酶是1967年在三个实验室同时发现的.它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键.但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的,而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA 连接酶催化成磷酸二酯键. Read More >>
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DNA分子的体外连接
所属分类:DNA连接 日期:2009-10-15 点击:291 顶:9
选择好适当的克隆(或表达,转化)质粒载体, 并确定重组方案后,下面要进行的就是DNA片段之间的体外连接,从而获得重组子.这个重组子可转入相应的宿主菌中用于对目的基因的扩增以及目的基因表达(如现代基因工程药物的生产),还可用于序列分析和转基因等重要生物技术的研究中.
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DNA 连接酶的连接原理
所属分类:DNA连接 日期:2009-10-15 点击:1169 顶:8
当两条单链的寡核苷酸与同一条靶序列完全互补配对时,DNA 连接酶可催化一条寡核苷酸3' -羟基末端和另一条寡核苷酸5'-磷酸末端通过磷酸二酯键连接;如果一条寡核苷酸3' -羟基末端的碱基出现了突变错配,DNA 连接酶就连接不上,不催化磷酸二酯键形成.
Read More >> - t4噬菌体dna连接酶 所属分类:DNA连接 日期:2009-10-15 点击:335 顶:8 基因工程中所用的连接酶被分有两种:一种是从大肠杆菌中分离得到的,称之为E·coli连接酶.另一种是从T4噬菌体中分离得到,称为T4连接酶. Read More >>
- DNA连接反应的影响因素 所属分类:DNA连接 日期:2009-09-27 点击:529 顶:13 DNA连接反应的影响因素有许多,如连接缓冲液的影响,pH的影响, ATP浓度的影响,连接温度与时间的影响, 酶浓度的影响等,本文将一一介绍. Read More >>
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DNA连接实验原理
所属分类:DNA连接 日期:2009-09-27 点击:377 顶:14
DNA连接就是DNA分子的体外连接在一定条件下, 由DNA连接酶催化两个双链DNA片段组邻的5’端磷酸与3’端羟基之间形成磷酸酸脂键的生物化学过程, DNA分子的连接是在酶切反应获得同种酶互补序列基础上进行的.
Read More >> - 目的基因的获得 所属分类:DNA连接 日期:2009-09-01 点击:605 顶:16 根据蛋白质肽链的氨基酸顺序推知遗传密码,用化学方法人工合成基因. 美国 Khorana1976 年用化学法首次合成了一种大肠杆菌酪氨酸 tRNA 基因. 270 个核苷酸.转入大砀杆菌中表达,获诺贝尔奖. Read More >>
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