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  • 质粒载体和外源DNA中限制酶切位点的性质 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2012-05-02 点击:16 顶:0 质粒载体和外源DNA中限制酶切位点的性质分析,及在质粒的以及外源DNA两端的限制酶切位点之间,不可能找到“门当户对”的搭配关系的解决方案. Read More >>
  • 重组克隆的筛选及酶切鉴定 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2012-05-02 点击:20 顶:0 重组克隆的筛选和鉴定是基因工程中的重要环节之一.本文将主要介绍重组克隆的筛选方法:β-半乳糖苷酶系统筛选法、快速裂解菌落鉴定质粒大小、限制酶图谱鉴定、Southern 印迹杂交、PCR法、菌落(或噬菌斑)原位杂交等,并采用限制酶图谱鉴定方法进行实验指导. Read More >>
  • 影响限制性内切酶活性的因素 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2011-06-15 点击:488 顶:0 下面是影响限制性内切酶活性的几个因素. Read More >>
  • 内切酶的特性、酶解和琼脂糖凝胶电泳 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2011-03-08 点击:125 顶:0 学习和掌握限制性内切酶的特性、酶解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法,理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具,琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定DNA片段的有效方法. Read More >>
  • DNA分子的限制性内切酶消化 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2011-03-01 点击:107 顶:1 限制性内切酶可特异地结合于一段被称为限制酶识别序列的DNA序列位点上并在此切割双链DNA.绝大多数限制性内切酶识别长度为4、5或6个核苷酸且呈二重对称的特异序列,切割位点相对于二重对称轴的位置因酶而异.一些酶 Read More >>
  • 质粒载体和外源DNA中限制酶切位点的性质 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2010-02-23 点击:142 顶:2 质粒载体中限制酶切位点的种类极为繁多,因而通常都有可能找到某种带限制酶切位点恰恰与外源DNA片段本身毫无二致的载体.这就具备一个不可比拟的优点,也应是可以用相应的限制酶消化重组质粒崦回收外源DNA.
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  • DNA 的定量与连接反应 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2010-02-23 点击:63 顶:2 本文主要介绍了DNA 的定量与连接反应的实验方法. Read More >>
  • 限制酶在各种NEBuffer 中的活性(NEBuffer Activity Chart for Restriction Enzymes) 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2010-02-23 点击:71 顶:2 对应每一种限制性内切酶,New England Biolabs 均提供彩色盖子的10X NEBuffer,以保证100%活性.下面表格中列出每一种酶及其随酶提供的最适宜的NEBuffer.同时也列出每种酶在四种不同的NEBuffer 中的大致活性,以帮助选择双酶切时最适宜的环境.除非特别指出,温育温度均为37°C.
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  • 限制性内切酶质量控制(Restriction Endonucleases Quality Control) 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2010-02-23 点击:109 顶:2 限制性内切酶的一个活性单位是指,在50μl 的反应体系里,采用随酶提供的 NEBuffer,用1个小时的时间,彻底消化1μg底物DNA所需要的酶量. 酶切反应应在带盖的Eppendorf 管中进行,选用技术数据卡上所标明的适宜温度.在确定酶活性之前,浓缩的酶应该用推荐的贮存液稀释成大约1,000 单位/ml.
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  • DNA酶切及凝胶电泳 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2010-02-23 点击:187 顶:2 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA.它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在.Ⅱ类由两种酶组成. Read More >>
  • RFLP和RAPD技术 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2010-02-23 点击:139 顶:2 DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础.RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究. Read More >>
  • 用于基因组文库的真核DNA的部分酶切:制备反应 所属分类:DNA酶切相关技术 日期:2010-01-14 点击:130 顶:3 本文主要介绍了用于基因组文库的真核DNA的部分酶切之制备反应的实验方法. Read More >>
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