- DNA的吸印转移法(Southern Blot) 所属分类:Southern Blotting 日期:2011-10-09 点击:199 顶:0 DNA经过限制性内切酶消化和凝胶电泳后,放入碱性溶液中使其变性,将变性后的单链DNA从凝胶中按原来位置和顺序用滤纸吸印转移到硝酸纤维膜上,然后再与标记探针杂交.此方法比较准确地保持了特异DNA序列在电泳图谱中的位置,而且能测定分子量. Read More >>
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地高辛标记cRNA探针
所属分类:Southern Blotting 日期:2010-12-29 点击:67 顶:0
本文介绍了地高辛标记cRNA探针的实验方案.包括:组织前处理、杂交、显示.
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地高辛配基随机标记DNA探针试剂盒成份
所属分类:Southern Blotting 日期:2010-12-22 点击:80 顶:0
地高辛配基随机标记DNA探针试剂盒成份:无标记对照DNA1,无标记对照DNA2DNA稀释缓冲液,标记对照DNA,六聚核苷酸混合物等等.
Read More >> - 地高辛配基随机标记DNA探针 所属分类:Southern Blotting 日期:2010-12-22 点击:71 顶:0 每次标准的反应可标记10ng至3μg线性的DNA,也可标记更大量的DNA,但所有的成分和体积要相应增加. Read More >>
- DNA探针标记常用试剂的配制 所属分类:Southern Blotting 日期:2010-12-22 点击:48 顶:0 本文主要介绍了DNA探针标记常用试剂及相关的配制. Read More >>
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RAPD操作要点
所属分类:Southern Blotting 日期:2010-09-15 点击:28 顶:0
RAPD操作要点:一是电泳时一般RAPD带有5-15条, 大小0.1-2.0kb.二是特异性的DNA带可以克隆作为一个新的分子标记应用.
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southern印迹杂交
所属分类:Southern Blotting 日期:2010-08-16 点击:238 顶:0
Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法.一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量.
Read More >> - 双链DNA探针切口平移法 所属分类:Southern Blotting 日期:2010-02-22 点击:54 顶:2 当双链DNA 分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA 聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端.同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸.由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA 链移动,用放射性核苷酸代替原先无放射性的核苷酸,将放射性同位素掺入到合成新链中. Read More >>
- 非放射性Dig-dUTP 所属分类:Southern Blotting 日期:2010-02-22 点击:78 顶:2 DNA是通过异羟基洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)配基标记的脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(dUTP)随机插入结合而被标记. Read More >>
- 电泳、转膜 所属分类:Southern Blotting 日期:2010-02-22 点击:142 顶:2 转膜是把DNA 从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定,是进行各种后续研究(如 RFLP 分析,阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提. Read More >>
- 分子杂交 所属分类:Southern Blotting 日期:2010-02-22 点击:156 顶:4 对于大的基因组,DNA 酶切图谱凭肉眼是分辨不开的(EB 染色),因为大小不等的分子呈现弥散分布,只有借助灵敏的放射性同位素(或其他化学发光物质),将靶 DNA 在凝胶上(膜上)的带型通过特定的探针与之杂交,转换成 X 光片上直观的带型,才能进行相关分析. Read More >>
- SOUTHERN BLOT的步骤(英文) 所属分类:Southern Blotting 日期:2010-02-22 点击:156 顶:2 本文介绍了SOUTHERN BLOT的实验步骤. Read More >>
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