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抗坏血酸含量测定( 2,6 一二氯酚靛酚法)

时间:2010-08-30 16:13:08 来源: 作者:
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摘要: 维生素 C 是一种水溶性维生素,是人类营养中最重要的维生素之一,人体缺乏维生素 C 时会出现坏血病,因此它又被称为抗坏血酸.此外维生素 C 还具有预防和治疗感冒以及抑制致癌物质产生的作用.

一、目的
    学习维生素 C 的生理功能和性质,掌握用 2 , 6 一二氯酚靛酚法测定维生素 C 的原理和方法.
二、原理
    维生素 C 是一种水溶性维生素,是人类营养中最重要的维生素之一,人体缺乏维生素 C 时会出现坏血病,因此它又被称为抗坏血酸.此外维生素 C 还具有预防和治疗感冒以及抑制致癌物质产生的作用.
    维生素 C 的分布很广,尤其在水果(如弥猴桃、橘子、柠檬、山楂、袖子、草莓等)和蔬菜(苋菜、芹菜、青椒、菠菜、黄瓜、番茄等)中的含量更为丰富.
    不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法,都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量.测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标.
    维生素 C 在金属铜和抗坏血酸氧化酶存在下极易氧化,因此,在用铜制品做食品时,维生素 C 易丢失.此外在碱性溶液中,维生素 C 也易被破坏,而在酸性溶液中比较稳定.利用它具有的还原性质可测定其含量.还原型抗坏血酸能被染料 2 , 6- 二氯酚靛酚氧化为脱氢型,该染料在碱性溶液中呈蓝色,在酸性溶液中呈红色,被还原后变为无色.因此用 2 , 6 一二氯酚靛酚滴定含有维生素 C 的酸性溶液时,维生素 C 尚未全部被氧化时,则滴下的染料立即使溶液变成粉红色,当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时,滴入的 2 , 6 一二氯酚靛酚立即使溶液呈现淡红色.用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色为滴定终点,根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量.
三、仪器、试剂和材料
1、仪器
( 1 )天平
( 2 )组织捣碎机
( 3 )微量滴定管( 5ml)
( 4 )容量瓶( 50ml)
( 5 )刻度吸管( 5 ml, 10 ml )
( 6 )锥形瓶( 100ml)
2、试剂
( 1 ) 1% 草酸溶液:草酸 1g 溶于 l00ml 蒸馏水中
( 2 ) 2 %草酸溶液:草酸 2g 溶于 l00ml 蒸馏水中
( 3 )坏血酸标准溶液( 0. 1 mg/ ml) : 精确称取 l0mg 纯抗坏血酸(应为洁白色,如变为黄色则不能用)用 1 %草酸溶液溶解并定容至 l00ml .此溶液应贮存于棕色瓶中,最好临用前配制.
( 4 ) 0 . 05 % 2,6 一二氯酚靛酚溶液:称取 500mg 2, 6- 二氯酚靛酚溶于 300ml 含 104 mg 碳酸氢钠( A. R )的热水中,冷却后用蒸馏水稀释至 1000ml ,滤去不溶物,贮存于棕色瓶中, 4.C 冷藏可稳定一周,临用前以标准抗坏血酸标定.
3、材料
    新鲜水果或蔬菜
四、操作步骤
1、提取抗坏血酸
    取新鲜水果或蔬菜 50g, 加入 50ml2 %草酸溶液,用组织捣碎机打成匀浆.过滤取得滤液,滤饼可用少量 2 %的草酸洗几次,合并滤液,记录滤液体积.
2、 2 , 6 一二氯酚靛酚溶液的标定
    准确吸取 4 . Oml 抗坏血酸标准液(含 0 . 4g 抗坏血酸)于 l00ml 锥形瓶中,加 16ml 1 %草酸溶液,用 2 , 6 一二氯酚靛酚滴定至淡红色( 15 秒内不褪色即为终点).记录所用染料溶液的体积,计算出 l ml 染料溶液所能氧化抗坏血酸的量.
3、样品滴定
    准确吸取样品提取液两份,各 20ml ,分别放入两个 100ml 锥形瓶中,滴定方法同 2 中的操作,另取 20ml 1 %草酸作空白对照滴定.

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